Erityiset vaiheet klorofyllin uuttamiseksi solujen fragmentoinnin avulla ultraäänisolumurskaimen avulla

Ultraäänisolumurskain hyödyntää ultraäänen dispersiovaikutusta nesteessä luomaan kavitaatiota, mikä rikkoo nesteessä olevia kiinteitä hiukkasia tai solukudoksia.
Biologisen teollisuuden kehitys on nostanut vaatimuksia ultraäänisolujauhetta käyttäville kokeille, kuten näytteen lämpötilan mittaamiseen ja säätelyyn, matalan lämpötilan jäähdytysnäytteiden ja koko koneen älykkyyden parantamiseen ja niin edelleen.
Erityiset vaiheet klorofyllin uuttamiseksi ultraäänisolumurskauksella ultraäänisolumurskaimen avulla:
1. Sentrifugoi tai suodata vesinäyte ja asenna asetaattikuitusuodatinkalvo imusuodattimeen. Kaada kvantitatiivinen määrä vesinäytettä suodatusta varten, ja alipaine suodatuksen aikana ei saa olla liian korkea (noin 50 kPa). Kun vesinäyte on otettu, jatka vetämistä 1-2 minuuttia suodatinkalvon kosteuden vähentämiseksi. Jos lyhytaikaista säilytystä tarvitaan 1-2 päivää, se voidaan säilyttää tavallisessa jääkaapissa pakastamista varten. Jos tarvitaan pitkäaikaista varastointia (30 päivää), se on säilytettävä matalalämpötilaisessa jääkaapissa (-20 astetta).
2. Ota kasviplanktonia sisältävä suodatinkalvo pois ja kuivaa sitä alhaisessa lämpötilassa jääkaapissa 6-8 tuntia. Leikkaa se saksilla pieniksi paloiksi ja laita se 5 ml:n tai 10 ml:n sentrifugiputkeen. Lisää 3-4 ml 90-prosenttista asetonia upottaaksesi palaset nestepinnan alapuolelle. Aseta palaset ultraäänisäiliöön ja käytä ultraääniaaltoja näytteen solujen rikkomiseen. (Kokeiden vertailu eri aikoina ja taajuuksilla helpottaa * pirstoutumisajan ja -taajuuden tunnistamista yhtenäisillä menetelmillä).
3. Sentrifugoi näytettä, jolle on tehty solufragmentointi ultraäänellä käyttämällä sentrifugia (3000-4000r/min) 10 minuuttia. Kaada supernatantti 5 ml:n tai 10 ml:n mittapulloon. Laimenna 5 ml:ksi tai 10 ml:ksi 90-prosenttisella asetonilla ja ravista hyvin.
4. Aseta supernatantti spektrofotometriin ja käytä 1 cm:n optisen polun kolorimetristä maljaa absorbanssiarvojen lukemiseen aallonpituuksilla 750 nm, 663 nm, 645 nm ja 630 nm. Käytä 90 % asetonia nollaabsorbanssimittauksena näytteen absorbanssin korjaamiseksi.